Human immunodeficiency virus bDNA assay for pediatric cases

Techniques to quantify plasma HIV-1 RNA viral load (VL) are commercially available, and they are adequate for monitoring adults infected by HIV and treated with antiretroviral drugs. Little experience on HIV VL has been reported in pediatric cases. In Argentina, the evaluation of several assays for VL in pediatrics are now being considered. To evaluate the pediatric protocol for bDNA assay in HIV-infected children, 25 samples from HIV-infected children (according to CDC criteria for pediatric AIDS) were analyzed by using Quantiplex HIV RNA 2.0 Assay (Chiron Corporation) following the manufacturer's recommendations in a protocol that uses 50 microliters of patient's plasma (sensitivity: 10,000 copies/ml). When HIV-RNA was not detected, samples were run with the 1 ml standard bDNA protocol (sensitivity: 500 HIV-RNA c/ml). Nine samples belonged to infants under 12 months of age (group A) and 16 were over 12 months (group B). All infants under one year of age had high HIV-RNA copies in plasma. VL ranged from 30,800 to 2,560,000 RNA copies/ml (median = 362,000 c/ml) for group A and < 10,000 to 554,600 c/ml (median = < 10,000) for group B. Only 25 of children in group B had detectable HIV-RNA. By using the standard test of quantification, none of the patients had non detectable HIV-RNA, ranging between 950 and 226,200 c/ml for group B (median = 23,300 RNA c/ml). The suggested pediatric protocol could be useful in children under 12 months of age, but 1 ml standard protocol must be used for older children. Samples with undetectable results from children under one year of age should be repeated using the standard protocol.

Troublesome diagnosis in two children born to HIV-1 infected mothers

Para determinar la infección vertical por HIV-1 en niños en forma temprana es necesario el uso de técnicas de diagnóstico virológico directo tales como la detección del ADN proviral por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), el aislamiento viral por cocultivo y la detección de antígeno p24 en plasma. Con el uso de estos métodos se describieron casos con resultados positivos en niños que finalmente resultaron no estar infectados. En este trabajo se describen dos casos de niñas hijas de madres HIV-1 positivas que presentaron dificultad para su diagnóstico. Se realizó el seguimiento clínico y de laboratorio de las dos pacientes hasta los 40 meses de edad. Las dos pacientes presentaron un desarrollo pondoestatural y madurativo normal, sin síntomas de enfermedad relacionados con el HIV. En ambas pacientes se encontró, como único hallazgo, la detección del genoma proviral por PCR en más de una muestra. Sin embargo la pérdida de anticuerpos específicos en pacientes con función inmune normal, clínicamente sanas, descartaría la infección por HIV-1. Cabría plantearse la infección con una variante defectuosa, una infección silente o la expresión de tolerancia inmunológica. Además podría plantearse como hipótesis el clearence viral

Etiología de las infecciones agudas del tracto respiratorio inferior en niños menores de 5 años en la ciudad de Buenos Aires / Lower respiratory tract infections in children under five years in Buenos Aires

El presente estudio fue planteado ante la necesidad de identificar los patógenos implicados en las infecciones agudas del tracto respiratorio inferior (IRA) adquiridas en la comunidad y para una población infantil urbana. La muestra estudiada comprendió 1230 pacientes menores de 5 años de edad con IRA, asistidos en tres hospitales públicos de la ciudad de Buenos Aires y alrededores entre 1984 y 1988, a los cuales se les efectuó pruebas diagnósticas convencionales y rápidas en sangre, secreción nasofaríngea, orina y líquido pleural. El estudio realizado permitió obtener diagnóstico etiológico en el 44,4 por ciento de los casos estudiados. La mayor frecuencia correspondió a agentes patógenos virales (30,2 por ciento), seguidos de bacterianos (10,9 por ciento) y de infecciones mixtas virus-bacteria (3,3 por ciento). El virus más frecuentemente detectado fue el virus sincicial respiratorio (VSR) asociado fundamentalmente a bronquiolitis, seguido por adenovirus, parainfluenza 1 y 3 e influenza A y B. La bacteria más frecuentemente detectada fue Streptococcus pneumoniae especialmente asociada a neumonías, seguida por Haemophilus influenzae b, Mycoplasma pneumoniae y Bordetella pertussis. Se pudo observar que a menor edad del niño fue mayor la frecuencia de detección viral. Los agentes bacterianos fueron más frecuentes en niños mayores de 12 meses. Estos resultados, limitados por la metodología empleada, pueden ser explicados por una distribución significativamente diferente de los casos de neumonía bacteriana, más frecuente en niños mayores de 24 meses

Aplicabilidad de técnicas rápidas de diagnóstico para la identificación de virus sincicial respiratorio y adenovirus / Applicability of rapid techniques for respiratory sincytial virus and adenovirus detection

El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia y aplicabilidad en nuestro medio de tres técnicas de análisis virológico rápido, inmunofluorescencia (IF), enzimo-ensayo (ELISA) y detección de genomas virales para diagnóstico de infección respiratoria causada por virus sincicial respiratorio (VSR) y adenovirus, en comparación con el método de aislamiento en cultivo de tejidos. Entre 1984 y 1988 se estudiaron 1230 aspirados nasofaríngeos (ANF) provenientes de niños menores de 5 años con infección aguda del tracto respiratorio inferior. En los ANF se determinó la presencia de antígenos de VSR y adenovirus por IF indirecta y ELISA y se intentó el aislamiento en cultivo de células Hep-2 y MRC-5 (considerado como método patrón). Para VSR, la especificidad y la sensibilidad de la IF con respecto al aislamiento en cultivo fue de 94,3 por ciento y 87,7 por ciento, respectivamente. Para adenovirus, en cambio se obtuvo una sensibilidad y especificidad del 33,3 por ciento y 99,9 por ciento. Con la técnica de ELISA se obtuvo para VSR una sensibilidad del 96,3 por ciento y una especificidad del 91,5 por ciento y para adenovirus 18,2 por ciento y 99,7 por ciento respectivamente. La técnica de hibridación en punto se desarrolló para su uso experimental en el diagnóstico de infecciones por adenovirus sobre 1002 ANF. La misma demostró tener una alta especificidad (96,5 por ciento) y una buena sensibilidad (85,7 por ciento). El costo estimado del IF fue aproximadamente la mitad que el aislamiento del cultivo. Estos resultados señalan a la IF como técnica de elección para el diagnóstico rápido de VSR, pero no para adenovirus, para el cual el aislamienmto en cultivo y la hibridación resultaron las mejores técnicas. La IF para el diagnóstico rápido para VSR debería ser implementado a nivel asistencial en hospitales pediátricos debido a que es el principal patógeno involucrado en la infección respiratoria aguda de las vías aéreas inferiores en niños menores de 5 años